20µG SS DNA Sentezi CRISPR Homolojisi Yönlendirilmiş Onarım Şablonu Tek Telli DNA Sentezi

Tek sarmallı DNA'nın (ssDNA veya ssODN), yüksek düzenleme verimliliği ve azaltılmış hedef dışı entegrasyon ile gen knock-in oluşturmak için en iyi CRISPR homoloji yönlendirmeli onarım (HDR) şablonu olduğu kanıtlanmıştır.CELLFREE artık CRISPR deneylerinizin düzenleme verimliliğini en üst düzeye çıkarmak için yüksek kaliteli, sekans onaylı ssDNA sunuyor.

CELLFRE servisi hızlı ve uygun fiyatla 5000 nt'ye kadar tam sıralı doğrulanmış parça sağlar.Bizim fragmanlarımız, klonal olarak saflaştırılmış çift sarmallı DNA'dan (dsDNA) türetilerek mümkün olan en yüksek kalitede sonuçlar elde edilir.

CRISPR GENE KNOCK-INS İÇİN SSDNA SENTEZİNİN AVANTAJLARI

• Hücresel uygulamadan sonra dsDNA'ya kıyasla daha düşük hücresel toksisite
• Daha güvenilir gen nakavtları için düşük hedef dışı entegrasyon
• Homolojiye yönelik onarım için yüksek özgüllük takma şablonları
• Hedeflenen insersiyonlar ve gen replasmanları için yüksek verimli vericiler
• Verim esnekliği - 3, 10 veya 20 ug liyofilize fragmanları seçin.

DÖNÜŞ SÜRESİ

TESLİMAT

• Sıra doğrulandı
• 3 ug, 10 ug veya 20 ug liyofilize DNA
• Jel görüntü, hizalama ile dizi izleme verileri ve dizi dosyalarını içeren Analiz Sertifikası (COA)

Uygulama

1) CRISPR tabanlı gen ekleme, değiştirme veya düzeltme

Çift sarmallı DNA (dsDNA) geleneksel olarak HDR donör DNA şablonları olarak kullanıldı, ancak son çalışmalar tek sarmallı DNA'nın (ssDNA veya ssODN) CRISPR tabanlı gen ekleme, değiştirme ve düzeltme için en iyi HDR kalıpları olduğunu gösterdi.Çift sarmallı DNA donörleriyle karşılaştırıldığında, ssDNA'lar, özellikle birincil hücrelerin, kök hücrelerin düzenlenmesinde ve transgenik hayvan modelinin geliştirilmesinde, hedef dışı entegrasyonun azalmasının yanı sıra, önemli ölçüde iyileştirilmiş düzenleme verimliliği ve spesifitesi gösterdi.
2) Laboratuvar ortamında transkripsiyon
İn vitro transkripsiyon (IVT) yöntemi, in vitro DNA şablonları kullanılarak RNA faj polimeraz (T7, T3 veya SP6) yoluyla RNA moleküllerinin transkripsiyonunu tarif eder.IVT için dairesel plazmid DNA, (PCR ile amplifiye edilmiş) DNA fragmanları ve tek zincirli DNA (ssDNA veya ssODN) dahil olmak üzere üç farklı tipte DNA şablonu kullanılabilir.