5µG Plazmid Hücre İçi Ekspresyon Maya Fermantasyonu Protein Ekspresyonu ve Saflaştırılması

Giriş

Maya protein ekspresyon sistemi, hem sekresyon hem de hücre içi ekspresyon için ideal olarak uygun bir ekspresyon sistemidir, çünkü maya nispeten kolay genetik manipülasyon ve ucuz ortam üzerinde yüksek hücre yoğunluklarına hızlı büyüme sağlar.

Suşlar

Farklı maya türleri, proteinleri salgılama, işleme ve değiştirme yeteneklerinde farklı gösterir, bu da farklı araştırma ve endüstriyel uygulamalar için farklı maya türleri anlamına gelir.Ortak maya protein ekspresyon sistemleriPichia pastoris, Saccharomyces cerevisiae, Kluyveromyces lactis, Hansenula polimorfası, ve Yarrowia lipolytica.

İfade vektör yapısı (isteğe bağlı)

CELLFREE, genlerin, metanol ile indüklenen pPICZα, pPIC9K veya komponent pGAPZa, vb. Gibi ticari ekspresyon vektörlerine doğrudan klonlanması hizmetini sağlar.

Teslimat içeriği: 1 tüp dondurularak kurutulmuş plazmid (2 ~ 5 ug / tüp) ve TOP10 plazmidini içeren 1 tüp gliserol

Teslimat TAT: 10-20 iş günü

Pichiapastorise dönüşen doğrusallaştırılmış vektör ve elektrik

Ayrıca bize yapılandırılmış bir rekombinant plazmid de verebilirsiniz (lütfen sekansın kodonunun optimize edildiğini onaylayın).Onları pichiapastorise dönüştürüyoruz.Taramadan sonra, ekspresyon laboratuarı ölçek testi için en az 6 koloni seçiyoruz.

Teslimat içeriği: pozitif kolonilerin tarama raporu

Teslimat TAT: 5 iş günü

İfade koşullarının optimizasyonu

Laboratuvar ölçeği testi işlemi sırasında sıcaklık, kültür ortamı, indüktör tipi, indüksiyon süresi, indüksiyon miktarı ve diğer faktörler de dahil olmak üzere çeşitli suşlar için uygun kültür koşullarını optimize edip test edeceğiz. SDS-PAGE veya Western blotto (isteğe bağlı olarak, müşteri, ekspresyon etkisini analiz etmek için değiştirilmiş bir birinci antikor sağlar).

Teslimat içeriği: Laboratuvar ölçekli test doğrulama raporunun bir kopyası

Teslimat TAT: 5 iş günü

Kuvvetlendirilmiş kültivasyon, ekspresyon ve saflaştırma ilgi proteini

Uygun ekspresyon koşulları ile suşları optimize etmek ve elde etmek ve rekombinant maya ekspresyonunu indüklemek için 1L veya daha büyük kültür skalası kullanın.İndüksiyondan sonra, bir aşamalı veya çok aşamalı saflaştırma yapılır. Saflaştırmayı doğrulamak için SDS-PAGE ve doğruluğunu doğrulamak için Western blotto (isteğe bağlı, müşteri bir ilk antikor sağlar) kullanırız.

Teslimat içeriği: 1-10 mg rekombinant proteinler ve saflaştırma raporu verileri

Teslimat TAT: 10-15 iş günü

Protein swith etiketleri için kaldırma hizmetini seçebilirsiniz (isteğe bağlı).

Protein sonrası işleme (isteğe bağlı)

Daha özel gereksinimleri olan proteinler için, deneyimli mühendislerimiz özel ihtiyaçlarınız için kişiye özel post servisler sağlayabilir.

Özellikleri

1. Gram düzeyinde protein üretimi: Endüstriyel enzimlerin özelleştirilmiş üretimi için uygundur.

2. Yüksek verim: Protein verimini 2 kat arttırın E. coli.Maya fermantasyonundan 5-10 g / L verim.

3. İstikrarlı üretim süreci: hedef protein ekspresyon kaseti genom içine entegre edilir ve stabil protein ekspresyon prosesine yol açar.