TALEN Hedeflenmiş Nakavt Moleküler Genetik Analiz

Giriş

Genom manipülasyonu, endojen kromozomal DNA'yı spesifik olarak modifiye etmek için kullanılabilen güçlü bir teknolojidir.Bu yaklaşım, bir geni yok etmek veya inaktive etmek, ters mutasyonları onarmak veya mikrobiyal popülasyonun çeşitliliğini arttırmak için kullanılabilir.Bu teknolojinin yardımıyla çeşitli mikroorganizmalar, insani ihtiyaçlarımızı karşılayan ve insanlara fayda sağlayan mühendislik mikroorganizmaları oluşturmak için genetik olarak modifiye edilebilir.Sentetik biyoloji, gene yönelik girişim veya çoklu gen ağı etkileşimi ve gen terapisi gibi alanlarda da kullanılabilir.Şu anda, mikrobiyal genom dönüşümü, TALEN hedefli gen nakavt, Cas9 sistem gen nakavt ve diğer teknik hizmetler sağlayabilir.

Gen Manipülasyon Süreci

1. DNA'yı organizmadan izole etmek.
2. DNA'yı DNA vektörüne koymak için.
3. Vektörü transfeksiyon veya transformasyon yoluyla konakçıya transfer etmek.

•  DNA izolasyonu

DNA'nın bir kısmını kısıtlama endonükleazları - tip II.DNA ipliği, kısa nükleotit sekansları ile sınırlanan spesifik yerlerde parçalanır.Her iki tel de kesilir.Sonra onları tanıyabilir ve agaroz jel elektroforezi ile boyutlarına göre kategorize edebiliriz.

• DNA'ya katılma

DNA ligazsegmentin özelliklerini yönetir.Yapışkan uçlar oluşturulur ve yerleştirme gerçekleşebilir.

• Ana Bilgisayara Aktarma

DNA için doğru vektörün seçilmesi kesinlikle gereklidir.Yabancı DNA'yı kabul etmeli ve hücre döngüsünü sürdürmelidir.En yaygın olanları bakterilerdir - özellikleE.coli.DNA'nın birvirüs transfeksiyon denir.Konakçı genom ile entegrasyonun başarılı olmasını sağladık.En önemlisi DNA'yı çoğaltma yeteneğini korumaktır.

Kullanım Komplikasyonları

Gen manipülasyonunun kullanımı zordur.İnsan genlerini değiştirebilen bir süreçtir.Bu yüzden birçok etik problem getiriyor.Güvenlik hala tartışılabilir.Bilim adamlarıgenetik çeşitlilik, çünkü değiştirilmiş organizmaların hepsi aynı olacaktır.